Серологическая диагностика сифилиса

В настоящее время для серологической диагностики сифилиса применяют:

• комплекс серологических реакций (КСР), в который входят реакция связывания комплемента с трепонемным и кардиолипиновым антигенами, микрореакция преципитации (МРП) с кардиолипиновым антигеном;
•реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
•реакция иммуноферментного анализа (ИФА).

В качестве отборочной реакции для массовых профилактических обследований населения используют микрореакцию преципитации с плазмой крови или инактивированной сывороткой крови обследуемых пациентов. Она ставится со специальным кардиолипиновым антигеном, и уже через 30—40 мин пациент получает ответ (отрицательный или положительный, обозначенный крестами: 2+ — слабоположительный, 3+ — положительный, 4+ —резкоположительный). Лица с положительными результатами МРП направляются в кож вендиспансеры для углубленного обследования на сифилис с использованием КСР, РИБТ, РИФ, ИФА. Учитывая относительную специфичность стандартных серореакций, пришли к соглашению, что во избежание диагностических ошибок необходимо использовать в работе не одну, а комплекс серологических реакций.

Реакция связывания комплемента, разработанная и внедренная в диагностику сифилиса Вассерманом, Нейссером и Бруком в 1906 г., широко используется в настоящее время. Она может быть резкоположительной (4+), положительной (3+), слабоположительной (2+) и сомнительной (1+).
Кровь для серологического исследования берут натощак в количестве 5—7 мл из локтевой вены, соблюдая правила асептики (у грудных детей чаще всего из височной вены).

Реакция Вассермана становится положительной спустя 2—4 недели после возникновения твердого шанкра или через 6—8 недель после заражения, а наиболее высокии титр реагинов определяется при вторичном свежем сифилисе.
Поскольку у ряда больных лепрой, туберкулезом, новообразованиями, аутоиммунными заболеваниями при беременности КСР могут быть ложноположительными, то для их дифференцирования с истинными позитивными КСР, а также для диагностики скрытых и поздних форм сифилиса рекомендуется использовать специфические серологические реакции — РИБТ, РИФ и ИФА. Кровь для этих реакций берется также натощак сухим шприцем в сухие стерильные пробирки в объеме 5— 10 мл, причем ее забор медицинская сестра производит в резиновых перчатках. В направлении следует указать Ф.И.О. больного, диагноз и на какое исследование направляется кровь. Реакции ставятся в специализированных серологических лабораториях при кожно-венерологических диспансерах.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) ставится в нашей стране в двух модификациях: РИФ-200 (испытуемая сыворотка разводится в 200 раз) и РИФ-абс (т. е. реакция с абсорбцией групповых антител, что повышает специфичность этих реакций). В основе РИФ лежит непрямой метод определения флюоресцирующих антител, где антигеном выступает взвесь убитых культуральных бледных трепонем. РИФ становится положительной одновременно с появлением твердого шанкра. Она положительная во вторичном и третичном периодах приобретенного сифилиса и при врожденном сифилисе.

Реакция иммобилизации бледных трепонем впервые была предложена в 1949 г. Р. Нельсоном и М. Мейером. В ее основе лежит способность сыворотки крови больного сифилисом обездвиживать бледные трепонемы (в качестве антигена выступает взвесь бледных трепонем, полученная из раннего орхита кролика, зараженного штаммом Никольса с количеством трепонем 10—15 в поле зрения) в присутствии комплемента. РИБТ становится положительной в конце первичного периода сифилиса и сохраняется таковой в последующих периодах развития инфекции.

Для проведения иммуноферментного анализа (ИФА) используются специальные тест-системы, которые выявляют антитела к бледной трепонеме в сыворотке человека за счет их взаимодействия с иммобилизованным на планшетах рекомбинантным трепонемным антигеном.